Priamy bilirubín

Všeobecné informácie

Bilirubín sa produkuje v makrofágoch enzymatickým katabolizmom hemovej frakcie z rôznych hemoproteínov. Asi 80% cirkulujúceho bilirubínu pochádza zo starých erytrocytov. Keď cirkulujúce erytrocyty dosiahnu koniec normálneho života asi 120 dní, sú retikuloendotelové bunky zničené. Oxidáciou hem vzniká biliverdín, ktorý sa zase metabolizuje na bilirubín. Zvyšných 15 - 20% cirkulujúceho bilirubínu pochádza z iných zdrojov (deštrukcia zrelých erytrocytov v hematogénnej kostnej dreni alebo metabolizmus ďalších proteínov obsahujúcich hémy - pečeňové cytochrómy, svalový myoglobín, enzýmy).

Takto vzniknutý bilirubín cirkuluje v krvi a je transportovaný do pečene vo forme rozpustného komplexu bilirubín-albumín. Aj keď je bilirubín pomerne silno viazaný na albumín, je možné ho ľahko extrahovať z krvi v pečeni. Na pečeňovej úrovni je bilirubín konjugovaný s kyselinou glukurónovou za pôsobenia UDP-glukuronyltransferáz. Konjugovaný bilirubín zahŕňa bilirubín-monoglukuronid, ktorý prevláda v pečeni, a bilirubín-diglukuronid, ktorý prevláda v žlčovej tekutine. Konjugovaný bilirubín sa transportuje do žlčových ciest, odkiaľ sa vylučuje spolu s žlčou do žlčových ciest a potom do čreva, kde prechádza sériou postupných redukcií s tvorbou urobilinogénu a sterkobilinogénu. Sterkobilinogén a malá časť urobilinogénu sa vylučuje stolicou; väčšina urobilinogénu sa reabsorbuje v čreve, portálnou cirkuláciou (entero-hepatálny obeh) sa dostane do pečene a znovu sa vylučuje žlčou.

Sérové hladiny bilirubínu sa zvyšujú, keď produkcia prekročí jeho metabolizmus a vylučovanie. Klinicky sa hyperbilirubinémia javí ako žltačka - žltá pigmentácia kože a skléry, ktorá sa nastavuje na hodnoty bilirubínu 2–2,5 mg/dl.

Poruchy metabolizmu bilirubínu možno rozdeliť do štyroch hlavných kategórií:

• zvýšená tvorba pigmentu;
• nízka absorpcia pečeňou;
• neadekvátna hepatálna konjugácia;
• znížené vylučovanie konjugovaného pigmentu z pečene a žlče.

V laboratóriu sa merajú dve frakcie pigmentu - konjugovaná vodorozpustná frakcia, ktorá poskytuje priamu reakciu s diazo reagentom a ktorá predstavuje konjugovaný bilirubín (vo forme mono- a diglukuronidu) a frakcia rozpustná v tukoch, ktorá predstavuje nekonjugovaný bilirubín.

Prvé tri poruchy metabolizmu bilirubínu sú spojené s prevažne nekonjugovanou bilirubinémiou a štvrtá kategória je spojená s prevažne konjugovanou bilirubinémiou a bilirubinúriou.

Celkový bilirubín v sére má zvýšené hodnoty v nasledujúcich prípadoch:

• nekomplikovaná hemolýza;
• hepatocelulárna žltačka;
• extrahepatálna obštrukcia žlčníka;
• vírusová hepatitída;
• alkoholická hepatitída.

Priamy bilirubín (BD)

Konjugovaný bilirubín, rozpustný vo vode a s vysokou reaktivitou, poskytuje farebnú reakciu s diazo reagentom, známym ako priamy bilirubín. Zvýšené priame hladiny sérového bilirubínu sú spojené so zníženým vylučovaním konjugovaného pigmentu z pečene a žlče a vyskytujú sa pri cholestatickej alebo hepatocelulárnej žltačke. Patologické zvýšenie priameho bilirubínu vedie k výskytu tohto pigmentu v moči. Pretože nepriamy bilirubín sa nevylučuje močom, prítomnosť bilirubínu v moči naznačuje zvýšenie sérového konjugovaného bilirubínu.

Zvýšené hodnoty priameho bilirubínu sa vyskytujú u:
• intrahepatálna obštrukcia:
* v dôsledku rodinných porúch funkcie vylučovania pečene:
-Dubin Johnsonov syndróm (chronická idiopatická žltačka s hodnotami celkového bilirubínu medzi 3 - 15 mg/dl s prevahou konjugovaného bilirubínu;
-Rotorov syndróm;
* v dôsledku získaných porúch funkcie vylučovania pečene:
-cholestáza vyvolaná liekmi;
-pooperačná žltačka;
-hepatitída a cirhóza - pri hepatocelulárnych ochoreniach zvyčajne dochádza k interferencii medzi tromi stupňami metabolizmu bilirubínu: absorpciou, konjugáciou a vylučovaním. Vylučovanie je však najviac ovplyvneným štádiom a vo výsledku prevažuje sérom konjugovaný bilirubín.
• extrahepatálna obštrukcia - mechanická nepriechodnosť žlčových ciest je spôsobená najčastejšie kameňmi, nádormi alebo striktúrami. Sérové hladiny bilirubínu zriedka presahujú 35 mg/dl.

POZNÁMKA:
Celkový bilirubín = Nekonjugovaný bilirubín (nepriamy) + priamy bilirubín
Celkový a priamy bilirubín sú určené analyzátorom; nepriamy bilirubín je výsledkom počtu.

zbierka

Výcvik pacientov - pôst (napr. pôst).

Odobratý exemplár - príde krv.

Zberová nádoba - vacutainer bez antikoagulancia s/bez separačného gélu.

Po zbere potrebné spracovanie - sérum ihneď oddeľte a zapracujte max. 4 hodiny; počas čakacej doby je sérum chránené pred svetlom (vystavenie svetlu spôsobuje výrazné poklesy po 2 - 3 hodinách). Ak nie je možné pracovať do 4 hodín, oddelené sérum sa uchováva pri 4 ° C alebo -20 ° C.

Skúšobný objem - minimálne 0,5 ml ser.

Príčiny odmietnutia dôkazov - hemolyzovaný exemplár, exemplár nechránený pred svetlom.

Stabilita vzorky - separované sérum je stabilné 4 hodiny pri izbovej teplote; 48 hodín pri 2-8 ° C; 6 mesiacov pri -20 ° C.

Metóda

Metóda - spektrofotometrické (kolorimetrické).

Referenčné hodnoty

Celkový bilirubín

Hodnoty (mg/dl)

predčasné: 1 deň

Načas: 1 deň

Deti i dospelí

Priamy bilirubín

Nepriamy bilirubín

Prevodný faktor: mg/dl x 17,1 = μmol/l.

Detekčný limit - 0,1 mg/dl (1,71 μmol/l).

Kritické hodnoty -> 15 mg/dl (celkový bilirubín).

Limity a interferencie

klesá: amikacín, antikonvulzívum, prednizón, teofylín, tioridazín, ursodiol.
• Analytické interferencie